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在我们的ICC程序中,我们将增加我们的第二抗体,进行 可选的双标签和核标记步骤, 我们的盖玻片安装到幻灯片中,并获得我们的抗体与图像
在荧光显微镜。 第一 我们吸液洗涤细胞的初级抗体溶液以下 用PBST洗涤三次,每次5分钟。 下一步准备floraform的标记的二抗将绑定到
初级抗体。 用二次封闭缓冲液稀释 在数据表上指定的推荐稀释 并温育在室温下静置1小时。
覆盖板带箔防止敏感染料的降解。 吸干关闭细胞洗涤二次抗体溶液中,接着
用PBST三次 ,每次5分钟。 作为一个可选的步骤,一个独立的一级和二级对可用于 可视化的第二个抗原表位使用不同的地板。
此外,DNA结合染料,如DAPI可以应用而不需要 二级抗体。 请参阅完整的书面诺伟司协议如何一倍的说明,
三重标签。 的盖玻片现在准备将其安装在显微镜载玻片上。 取一个干净的幻灯片和分配一滴抗淬灭安装介质慢慢
拨号的移液管下的柱塞。 小心地取出盖玻片井, 让多余的洗滴 并把细胞面朝下到幻灯片上。
可以用来清除指甲油盖玻片密封,并防止它 干燥。 相片数现在可以是可视化的显微镜下或贮存于-20
或在一个黑暗的滑动箱或幻灯片书4摄氏度。 限制的时间量每张幻灯片暴露在显微镜的光助手
在延长的荧光信号 防止光漂白。