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(Chinese-Traditional translation by Holly YF Chung, University of Michigan Graduate Student) 酵素免疫分析法,或稱ELISA,是一種常用的血清學檢測方式。
這個動畫是用來解釋ELISA是如何操作的。
ELISA血清學檢測法,通常是在多孔微陣列盤上操作。所以,
稀釋不同倍數的血清可以方便的在多孔盤上製備、操作。
為了讓我們理解ELISA是如何操作,
讓我們專注在一個孔槽裡面發生的事情。
進行測定前,多個槽裡的每個小孔裡都已被塗上目標抗原。
如果是商業性的檢測,製造商會把這個步驟先做好。
開始測試時,孔槽會裝盛稀釋過的病人血清。
如果病人血清中有抗體存在,它們會和已經在孔壁上的抗原結合,
而被固定在(卡在)孔槽底部。
但是,只有抗原特異性的抗體才會緊緊地和抗原結合而被固定在孔槽中。
接著,(用緩衝液沖)洗出未和目標抗原相結合的抗體。
然後,加入含有動物抗體的溶液。(*註;此動物抗體是能夠抗人體抗體的。)
這第二(動物)抗體有個用共價鍵相連的酶。
各孔槽再t沖洗一遍,但這次,是為了 沖除沒有和目標抗體相結合的第二抗體 (與酶共價結合)。
最後,加入一個可以使酶呈色的受質。
受質和第二抗體上的酶作用後,就會產生顏色。
因著不同濃度的目標抗體存在,孔槽溶液會產生不同程度的顏色變化。
這樣的顏色變化,可以用肉眼辨識,或是用多孔盤電子讀取器量化抗體濃度。
血清濃度隨著稀釋而降低,能夠和抗原產生反應的抗體濃度也因而隨之下降
所以顏色變化也因而由濃變淡。
效價,是指最大的抗體稀釋濃度所呈現一定程度的顏色變化。
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